méthodes microbiologiques pour l'étude de l'eau, du sol et de l'air

Les micro-organismes – minuscules créatures plus souvent unicellulaires, qui sont très répandus dans la nature. Ils se trouvent dans tous les milieux (air, sol, eau) chez les humains et les animaux, dans les plantes.

la diversité qualitative et le nombre d'organismes dépendent essentiellement de composés nutritionnels. Mais il est aussi important que l'humidité, la température, l'aération et l'action de la lumière solaire et d'autres facteurs.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Méthodes d'études sanitaires et microbiologiques milieux naturels peuvent détecter la présence d'agents pathogènes et de déterminer leur montant en fonction des résultats obtenus, pour élaborer des mesures pour éliminer et prévenir les maladies infectieuses. En outre, compte quantitative est nécessaire pour la modélisation des écosystèmes et le développement des processus naturels de gouvernance. . Considérons encore quelles sont les méthodes d'examen microbiologique.

sol

Il est considéré par les spécialistes comme l'une des voies de transmission de pathologies infectieuses. Avec les sécrétions du patient humain ou animal chez les agents pathogènes pénétrant dans le sol. Certains d'entre eux, en particulier, des spores, peut persister dans le sol pendant une longue période (parfois pendant des décennies). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Les agents pathogènes de chute du sol telles infections dangereuses telles que le tétanos, l' anthrax, le botulisme, et ainsi de suite. Méthodes d'étude sanitaire et microbiologique du sol permettent de définir « nombre de germes » (le nombre de micro – organismes dans le sol d'un gramme), et l' indice coli (le nombre de E. coli) .

L'analyse du sol: une vue d'ensemble

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Méthodes pour l' examen microbiologique du sol doit être principalement attribué la microscopie directe et de la culture sur solide milieu nutritif. Les populations de micro-organismes et de leurs groupes qui peuplent le sol, diffèrent sur le statut taxonomique et les fonctions écologiques. Dans la science, ils sont unis sous le terme générique « biote du sol. » Primaire – grand nombre de micro-organismes de l'habitat. Dans gramme de sol est présent de 1 à 10 milliards de dollars de leurs cellules. Dans ce contexte, prend activement décomposition de la matière organique, avec la participation de divers micro-organismes saprophytes.

Des études microscopiques de méthode microbiologique: les étapes

L'analyse du milieu commence par échantillonnage. A cet effet, préalablement pelés et couteau d'alcool râpée (pelle peut être utilisée). Après cela, la préparation des échantillons. L'étape suivante – compter les cellules frottis colorés. Examiner chaque étape séparément.

échantillonnage

Dans l'analyse des sols agricoles ont tendance échantillons prélevés à une profondeur de l'ensemble de la couche. Tout d'abord enlevé 2-3 cm au-dessus du sol, car il peut être présent en une microflore étrangère. Par la suite, avec une superficie de terrain étudiée se monolithes. La longueur de chacun d'entre eux doit être conforme à l'épaisseur de la couche à partir de laquelle vous voulez goûter.

Sur un terrain de 100-200 mètres carrés. 7-10 m échantillons sélectionnés. Le poids de chaque – de l'ordre de 0,5 kg. Les échantillons doivent être soigneusement mélangés dans le sac. Prenez ensuite l'échantillon moyen pesant environ 1 kg. Il doit être placé dans le paquet de parchemin (stérile) enfermé dans un sac en tissu. Avant l'analyse directe de l'échantillon stocké dans le réfrigérateur.

préparation de l'enquête

Le sol agité versé sur verre sec. Son pré-essuyer avec l'alcool et brûler au-dessus du brûleur. Avec un sol spatule soigneusement mélangé uniformément et élargi. Il est obligatoire d'enlever les racines et autres éléments étrangers. Pour ce faire, utilisez une pince à épiler. Avant pincettes de fonctionnement et une spatule au-dessus du brûleur à feu et on laisse refroidir.

Sur les différentes parcelles de sol réparties sur le verre, sélectionné de petites portions. Ils ont pesé dans un plat en porcelaine à l'échelle technique. является специальная обработка образца. étape obligatoire de la méthode microscopique des études microbiologiques est le traitement spécial de l'échantillon. 2 doit être préparé à l'avance, flacon stérile. Leur taille ne doit pas dépasser 250 ml. Un des flacons est versé dans 100 ml d'eau du robinet. Parce qu'il faut échantillon liquide 0,4-0,8 ml du sol et humidifié à une pâte. Le mélange doit être frotté avec un pilon de doigt ou de caoutchouc pendant 5 minutes.

L'eau du premier flacon ont été transférés dans un ballon vide de masse du sol. De plus, en se frottant le dos. Après cette masse est transférée dans un ballon près de la flamme du brûleur. Récipient avec la suspension du sol a été secoué sur un agitateur pendant 5 min. Par la suite, on a laissé décanter pendant environ 30 secondes. Ceci est nécessaire afin de permettre les grosses particules de se déposer. Après une demi-minute de masse est utilisée pour préparer la préparation.

Les comptages de cellules sur frottis fixes

, разработанному Виноградским. étude microscopique directe du sol est effectuée par la méthode des études microbiologiques, mis au point Vinogradskii. Dans certain volume de la suspension a été compté le nombre de cellules de micro-organismes. L'étude des frottis fixes peuvent stocker des médicaments à long terme et effectuer des calculs à tout moment.

Préparation du médicament comme suit. Une certaine quantité de suspension épaisse (typiquement 0,02-0,05 ml) est appliqué avec une micropipette sur la lame. A cette solution, on a ajouté une goutte d'agar-agar (polysaccharide agaropectine mélange et agarose extrait d'algues brunes et rouges de la mer Noire), agité rapidement et répartis sur une superficie 4-6 carrés. cm. Pap séché à l'air et fixée pendant 20-30 minutes. l'alcool (96%). Ensuite, le médicament humidifiée avec de l'eau distillée et placé dans le 20-30 min p-p carbolic érythrosine.

Après coloration, on le lave et on le sèche à l'air. Les comptages de cellules réalisées à partir de la lentille à immersion.

Semer sur un support solide

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. méthodes microbiologiques pour l' examen microscopique peut détecter un grand nombre de micro – organismes. Mais malgré cela, la méthode d' inoculation est dans la pratique la plus courante. Son essence consiste à ensemencer quantité de médicament (suspension du sol) dans une boîte de Pétri sur un milieu solide.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Cette méthode de recherche microbiologique prend en compte non seulement la quantité , mais aussi le groupe, et dans certains cas, et la composition des espèces de la flore microscopiques. Compter le nombre de colonies produites, habituellement du fond de la boîte de Pétri en lumière transmise. Sur la surface calculée placé un marqueur ou de points d'encre.

Analyse de l'eau

La microflore du corps de l'eau, en règle générale, reflète la composition microbienne du sol autour d'elle. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Dans ce contexte, les méthodes d'analyse sanitaire et microbiologique de l' eau et le sol revêtent une importance particulière pratique dans l'étude de l'état d'un écosystème particulier. L'eau douce contient, en règle générale, les coques, les bactéries en forme de bâtonnet.

Dans l'eau se trouvant Anaérobies en petites quantités. En règle générale, elles se multiplient au fond de masses d'eau, dans la boue, en prenant part au processus de purification. océans et les mers microflore avantageusement représentés bactéries halophiles (halophiles).

Dans l'eau, les puits artésiens sont pratiquement pas de micro-organismes. Cela est dû à la capacité de filtrage de la couche de sol.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Les méthodes classiques de recherche microbiologique de l' eau considérée comme la définition microbienne et coli ou si un titre d'indice. Le premier indicateur définit le nombre de bactéries dans le liquide de 1. Coli indice représente le nombre de coliformes présents dans un litre d'eau, et, si titre – le nombre minimum ou maximum de liquide de dilution dans lequel ils peuvent encore être détectés.

Détermination du nombre microbien

Cette méthode examen microbiologique de l'eau sanitaire est la suivante. Dans 1 ml d'eau est déterminé nombre de bactéries anaérobies mésophiles et facultatives (intermédiaire) aérobies capables de viande sur une gélose peptone-(milieu primaire) à 37 °. pendant la journée pour former des colonies visibles sous un grossissement de 2 à 5 p. ou l'œil nu.

является посев. L'étape clé de la méthode d'analyse microbiologique de l' eau est semée. Parce que chaque échantillon est semée au moins 2 volumes différents. Lorsque l'analyse de l'eau du robinet dans chaque tasse est faite de 1-0,1 ml de liquide pur et contaminé 0,01-0,001 ml. Pour l'inoculation de 0,1 ml ou plus petit volume de fluide est dilué avec distillée (stérile) de l'eau. Régulièrement préparer des dilutions décimales. 1 ml de chacune d'entre elles est faite dans deux boîtes de Pétri.

La reproduction rempli de gélose nutritive. Il faut d'abord faire fondre, et laisser refroidir à 45 °. Après agitation, le milieu actif est laissé sur une surface horizontale pour la solidification. À 37 degrés. les cultures sont tout au long de la journée. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. La méthode considérée de la recherche microbiologique de l' eau tient compte des résultats de ces plats où le nombre de colonies dans la gamme de 30 à 300.

air

Il est considéré comme un terrain de transit pour les micro-organismes. являются седиментация (оседание) и аспирация. Les principales méthodes d'études microbiologiques sont la sédimentation d'air (régler) et l' aspiration.

environnement d'air microflore est arbitrairement divisé en variable et constante. Le premier groupe comprend les levures, les cocci chromogène, bacillus portant des spores coli et d'autres micro-organismes qui sont résistants au séchage, exposition à la lumière. Les représentants microflore variables, pénétrant dans l'air de leur habitat habituel, conservent longtemps leur vitalité.

Dans l'air des grandes villes des micro-organismes beaucoup plus que dans l'environnement de l'air des zones rurales. Au cours des mers, les forêts sont très peu de bactéries. purification de l'air faciliter la précipitation: la neige et la pluie. microbes intérieur bien plus que dans des espaces ouverts. Leur nombre augmente en hiver en l'absence de ventilation régulière.

sédimentation

считается простейшим. Cette méthode de recherche microbiologique en microbiologie est considérée comme la plus simple. Il est basé sur le dépôt des gouttelettes et des particules sur la surface de la gélose dans une boîte de Petri ouverte par gravité. Procédé de sédimentation ne peut pas déterminer avec précision le nombre de bactéries dans l'air. Le fait est que, dans une coupe ouverte pour attraper la fraction fine des particules de poussière et les gouttelettes de très difficile bactérienne. Sur la surface retenue principalement des particules grandes.

Cette méthode est utilisée pour l'analyse de l'air. Cet environnement caractérisé par de grandes fluctuations dans la vitesse du flux d'air. Sédimentation peut toutefois être utilisé en l'absence de dispositifs plus sophistiqués ou source d'énergie électrique.

Déterminer le nombre de méthode microbienne effectuée par Omelyansky. Conformément à cela, pendant 5 minutes sur une surface de 100 agar carré. cm installe un certain nombre de bactéries est présent dans 10 litres d'air.

Commander 535 « Sur l'unification des méthodes microbiologiques d'investigation »

L'analyse bactériologique occupe une place importante dans les activités cliniques et de laboratoire complexes visant à le diagnostic, la prévention et le traitement de diverses maladies infectieuses. Cependant, l'étude de l'environnement, ils ne sont pas limités.

Il est particulièrement important de l'analyse bactériologique de matériel biologique dans les hôpitaux. Pour les recherches menées dans les établissements de santé, des besoins accrus. Le but de l'Ordre « Sur l'unification des méthodes microbiologiques d'investigation » est d'améliorer l'analyse bactériologique, l'amélioration de la qualité et l'efficacité des diagnostics microbiologiques.

L'examen microscopique des frottis chez les femmes

Il est une méthode d'analyse clé pour le diagnostic des infections, des infections sexuellement transmissibles et les infections opportunistes (bactéries opportunistes).

L'analyse microscopique pour évaluer la composition qualitative et quantitative de la microflore, vérifier l'exactitude de l'échantillonnage. Par exemple, la présence de l'épithélium vaginal chez les écouvillonnages de canal cervical indique une violation des règles de sélection d'un échantillon biologique.

On dit que l'examen microbiologique dans ce cas est généralement suivi par quelques problèmes. Ils sont liés au fait que dans le tractus génital inférieur est présente normalement une microflore diversifiée qui varie à différents âges. Pour améliorer l'efficacité de la recherche et ont élaboré des règles normalisées.

Le diagnostic des infections virales

Elle est réalisée par des procédés de détection d'agents pathogènes d'ARN et d'ADN. Ils sont basés principalement sur la détermination des séquences de nucléotides dans le matériel pathologique. A cet effet, les sondes moléculaires. Ils sont produits artificiellement des acides nucléiques complémentaires à (complémentaire à) les acides virales marquées avec un marqueur radioactif ou la biotine.

La particularité de la méthode est répétée de la copie du fragment d'ADN spécifique contenant quelques centaines de (ou dizaines de paires) nucléotide. la réplication (copie) est que l'extension peut commencer que dans certaines unités. amorces (amorces) utilisés pour les créer. Ils sont oligonucléotides synthétisés.

diagnostic par PCR (amplification en chaîne par polymérase) est simple dans l'exécution. Cette méthode vous permet d'obtenir rapidement le résultat en utilisant une petite quantité de matériel pathologique. Utilisation des diagnostics PCR identifie les infections aiguës, chroniques et latentes (cachées).

Lorsque la sensibilité de cette méthode est considérée comme plus préférable. Cependant, les systèmes de test actuels ne sont pas assez fiables, de sorte que le diagnostic PCR ne peut pas remplacer complètement les méthodes traditionnelles.