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Méthodes en microbiologie Microscopic

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. les méthodes de recherche sont des moyens d'Microscopic explorer une variété d'objets avec l'utilisation d'équipements spéciaux. Il nous permet de considérer la structure des substances et organismes, dont l'ampleur est au-delà des limites de la résolution de l'oeil humain. L'article donne une brève analyse des méthodes microscopiques.

vue d'ensemble

используют в своей практике разные специалисты. Les méthodes modernes d'examen microscopique en utilisant différents experts dans leur pratique. Parmi ceux-ci sont les virologues, cytologique, hématologie, la morphologie et les autres. Les principales méthodes d'examen microscopique sont connus depuis longtemps. La première est une façon de regarder la lumière des objets. Ces dernières années, activement introduit dans la pratique, et d'autres technologies. . Ainsi, la popularité de contraste de phase acquise, luminescent, interférence, polarisation, infrarouge, ultraviolet, méthode stéréoscopique de la recherche. Elles sont toutes basées sur une variété de propriétés de la lumière. . En outre, largement utilisé des méthodes de microscopie électronique. Ces méthodes permettent aux objets d'affichage au moyen d'un flux directionnel de particules chargées. Il convient de noter que ces méthodes d'étude sont utilisés non seulement dans la biologie et la médecine. в промышленности. méthode très populaire de l' étude microscopique des métaux et alliages dans l'industrie. Ceci permet à l'étude pour évaluer le comportement des composés pour produire des technologies pour minimiser la probabilité de rupture et une résistance accrue.

Caractéristiques: moyens de lumière

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. De telles méthodes microscopiques pour l' étude des microorganismes et d' autres installations en fonction des différentes résolution équipements. Un facteur important à cet égard est la direction des caractéristiques du faisceau de l'objet lui-même. Ce dernier, en particulier, peut être transparent ou opaque. Conformément aux propriétés de l'objet, en changeant les propriétés physiques du flux lumineux – la luminosité et de couleur en raison de l'amplitude et la longueur d'onde plan, la phase et la direction de propagation des ondes. . Sur l'utilisation de ces caractéristiques et construire différentes méthodes microscopiques.

spécificité

Pour étudier les moyens d'objets légers, généralement colorés. Cela permet d'identifier et de décrire ces ou d'autres propriétés. Il est nécessaire que le tissu a été fixé, étant donné que la coloration révèlent certaines structures exclusivement dans les cellules tuées. Dans les cellules vivantes séparent un colorant sous forme de vacuoles dans le cytoplasme. Elle ne peint pas sur la structure. Mais avec les objets vivants et peuvent être étudiés à l'aide d'un microscope optique. A cet effet, moyen essentiel de l'apprentissage. Dans de tels cas, un condenseur à fond noir. Il est intégré au microscope optique.

L'étude des objets non peintes

Elle est réalisée par microscopie à contraste de phase. Cette méthode est basée sur la diffraction du faisceau en conformité avec les caractéristiques de l'objet. Au cours de l'exposition marquée changement de phase et longueur d'onde. Dans l'objectif de microscope est présent plaque translucide. En direct ou fixe, mais pas les objets peints en raison de sa transparence, presque ne change pas de couleur, et l'amplitude du faisceau en passant par eux, provoquant seulement un changement de la phase d'onde. Mais dans ce cas, après avoir traversé l'objet, le flux lumineux dévié par la plaque. En conséquence, entre les poutres, manquant à travers l'objet et entrant dans un fond clair, la différence de longueur d'onde se produit. A une certaine valeur de son effet visuel se produit – l'objet sombre sera clairement visible sur un fond clair ou vice-versa (en conformité avec les caractéristiques d'une plaque de phase). Pour obtenir cette différence doit être d'au moins 1/4 longueur d'onde.

méthode Anoptralny

Il est une sorte de méthode contraste de phase. Procédé Anoptralny implique l'utilisation d'une lentille avec des plaques spéciales, qui modifient que la couleur et la luminosité de la lumière ambiante. Cela élargit considérablement les possibilités d'étudier des objets vivants non colorés. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. la recherche de la méthode du microscope à contraste de phase appliquée en microbiologie, parasitologie dans l'étude des cellules animales et végétales, les protozoaires. Dans le procédé de l'hématologie est utilisée pour calculer et déterminer la différenciation des cellules du sang et la moelle osseuse.

techniques d'interférence

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Ces méthodes de recherche microscopiques résolvent généralement les mêmes problèmes que le contraste de phase. Toutefois, dans ce dernier cas, les experts ne peuvent observer les contours des objets. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Les méthodes de recherche microscopiques d'interférence permettent d'étudier leur part, procéder à une évaluation quantitative des éléments. Ceci est possible grâce à la division du faisceau lumineux. Un courant passe à travers l'objet des particules, et l'autre – par. Dans l'oculaire du microscope, ils se rencontrent et interfèrent. La différence de phase résultante peut être déterminé par le poids des différentes structures cellulaires. Lorsque la mesure séquentielle est à l'prédéterminée indice de réfraction peut être réglé tissus non fixés épais et objet vivant, celui – ci la teneur en protéines, la concentration des solides et de l' eau, et ainsi de suite. En accord avec les données reçues des spécialistes sont en mesure d'évaluer indirectement la perméabilité de la membrane, l' activité enzymatique, le métabolisme cellulaire.

polarisation

Elle est réalisée au moyen de prismes Nicol ou polaroids vaporeux. Ils sont placés entre l'échantillon et la source lumineuse. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. méthode de microscopie polarisante de la recherche en microbiologie nous permet d'étudier des objets avec des propriétés non homogènes. Dans les structures isotropes la vitesse de propagation de la lumière est indépendante du plan choisi. Dans le taux des systèmes anisotropes varie en fonction de la lumière orientée selon l'axe transversal ou longitudinal de l'objet. Si la valeur d'indice de réfraction le long de la structure sera plus grande que le long de la transversale, crée une double réfraction positive. Ceci est typique de nombreux objets biologiques qui ont trouvé une orientation moléculaire stricte. Ils sont tous anisotrope. Dans cette catégorie, notamment, le myofibrilles, neurofibrilles, dans l'épithélium cil vibratile, les fibres de collagène et d'autres.

valeur de polarisation

Une comparaison de la nature du rayonnement et de l'anisotropie d'indice de réfraction de l'objet, il est possible d'estimer la structure moléculaire de l'organisme. méthode de Polarisation sert l'une des méthodes d'analyse histologique utilisés dans cytologique et ainsi de suite. Non seulement les objets peints peuvent être étudiés à la lumière. méthode Polarisation permet d'examiner et sans tache non fixée – autochtones – préparations de coupes de tissus.

techniques fluorescentes

Elles sont basées sur les propriétés de certains objets donnent lueur dans la partie bleue-violette du spectre ou les rayons UV. De nombreuses substances telles que des protéines, des vitamines, des co-enzymes, médicaments, doués d'une luminescence primaire (en). D'autres objets commencent à briller en ajoutant un fluorochrome – colorants spéciaux. Ces additifs sont sélectivement diffuse ou distribué dans les structures cellulaires distincts ou de composés chimiques. Cette propriété a été la base de l'utilisation de la microscopie à fluorescence avec histochimie et études cytologiques.

Domaines d'utilisation

En utilisant des experts immuno-fluorescence détecter des antigènes viraux et leur concentration sont identifiés virus ajustés anti-corps et des antigènes, des hormones, des divers produits métaboliques et ainsi de suite. À cet égard, le diagnostic de l' herpès, les oreillons, l' hépatite B, la grippe et d' autres infections en utilisant des méthodes fluorescentes de recherche sur les matériaux. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Microscopic méthode immuno-fluorescent détecte malignité de la tumeur, de déterminer les zones ischémiques du coeur au cours des premiers stades d'une crise cardiaque et ainsi de suite.

L'utilisation de rayons ultraviolets

Il est basé sur la capacité d'un certain nombre de substances dans des cellules vivantes ou des micro-organismes sont fixés, mais non coloré transparent sous les tissus de la lumière visible à absorber les rayons UV d'une longueur d'onde spécifique. Cela est vrai en particulier pour les composés de poids moléculaire élevé. Ceux-ci comprennent des protéines, des acides aromatiques (méthylalanine, le tryptophane, la tyrosine, etc.), des acides nucléiques et des bases puriques piramidinovye et ainsi de suite. La microscopie UV permet de spécifier l'emplacement et le nombre de ces composés. Dans l'étude des êtres vivants professionnels peuvent observer les changements dans leurs processus métaboliques.

en outre

La microscopie infrarouge est utilisée dans l'étude sont opaques à la lumière et aux rayons ultraviolets par absorption des objets dont la longueur d'onde d'écoulement structures 750-1200 nm. Pour appliquer cette méthode, il n'y a pas besoin d'effectuer une pré-exposer les médicaments à un traitement chimique. En règle générale, la méthode IR est utilisée en anthropologie, la zoologie et d'autres sciences de l'industrie. En ce qui concerne la médecine, cette méthode est utilisée principalement en ophtalmologie et Neuromorphology. Les objets d'étude dimensions à l'aide d'un microscope stéréoscopique. la conception matérielle permet de surveiller l'œil gauche et à droite à un angle différent. les objets sont étudiés à Opaque grossissement relativement faible (120 fois au maximum). méthodes stéréoscopiques sont utilisées dans la microchirurgie, pathomorphologie en médecine légale.

La microscopie électronique

Il est utilisé pour étudier la structure des cellules et des tissus dans les niveaux macromoléculaires et subcellulaire. La microscopie électronique nous a permis de faire un saut qualitatif dans le domaine de la recherche. Cette méthode est largement utilisée en biochimie, l'oncologie, la virologie, la morphologie, l'immunologie, la génétique, et d'autres domaines. amélioration significative de la résolution fournie par le flux de la capacité de l'équipement d'électrons qui passent à travers le champ électromagnétique de vide. Ce dernier, à son tour, créer des lentilles spéciales. Les électrons sont capables de passer à travers la structure de l'objet ou réfléchi par les écarts par rapport à des angles différents. Le résultat est affiché sur l'écran fluorescent du dispositif. Si la microscopie de transmission vue plane obtenue lors de la numérisation respectivement entourent.

Pré-requis

Il convient de noter que, avant l'examen au microscope électronique passe, l'objet est soumis à une formation spéciale. En particulier, l'utilisation de la fixation physique ou chimique des tissus et des organismes. matériel de biopsie en coupe et, en outre, essoré, est noyé dans une résine époxy, découpé couteaux de verre ou de diamant sur des coupes ultraminces. Ensuite, leur contraste et leur étude. Le microscope à balayage examine la surface des objets. Pour ce faire, ils ont pulvérisé une substance spéciale dans la chambre à vide.